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液相色譜儀操作注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2024-10-08

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液相色譜儀基本操作流程:

一、開(kāi)機(jī)

1.打開(kāi)送液泵電源,打開(kāi)排液閥(反時(shí)針旋轉(zhuǎn)180度),按purge鍵進(jìn)行排氣泡的操作,確認(rèn)輸液管路中無(wú)氣泡時(shí)停止該操作,將排液閥旋回到原位置。

2.設(shè)定流速,平衡柱子30分鐘[Fun]+“流速"+[enter]

3.打開(kāi)測(cè)器電源,設(shè)定波長(zhǎng)[Fun]+“波長(zhǎng)"+[enter]+[CE]

4.打開(kāi)工作站(積分儀),設(shè)定相關(guān)參數(shù)

二、進(jìn)樣及數(shù)據(jù)采集

三、數(shù)據(jù)處理及打印報(bào)告

四、關(guān)機(jī):

1.數(shù)據(jù)采集完畢即可關(guān)閉檢測(cè)器;

2.泵更換甲醇沖洗流路30分鐘(如使用緩沖鹽流動(dòng)相請(qǐng)先用水沖洗流路10分鐘);

3.關(guān)泵

液相色譜儀基本操作注意事項(xiàng):

1.流動(dòng)相必須用HPLC(色譜)級(jí)的試劑,使用前過(guò)濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用045u或更細(xì)的膜過(guò)濾)。

2.流動(dòng)相過(guò)濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。

3.不能純乙腈作為流動(dòng)相,這樣會(huì)使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。

4.使用緩沖溶液時(shí),做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子(一小時(shí)),然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對(duì)于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20以上。

5.長(zhǎng)時(shí)間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機(jī)相(如甲醇等),因?yàn)榧兯组L(zhǎng)霉。

6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。

7.C18柱不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。

8.堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過(guò)濾器→管路過(guò)濾器→單向閥查并清洗。

   清洗方法;①以異丙醇作溶劑沖洗:②放在異丙醇中間用超聲波清洗;用10%稀硝酸清洗。

9.氣泡會(huì)致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過(guò)程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

10.如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時(shí),要使用注射器吸液:通常在輸液前要進(jìn)行流動(dòng)相的清洗。

11.要注意柱子的PH值范圍,不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品,特別是堿性樣品。

12.更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊清洗,然后插入新的流動(dòng)相中。更換無(wú)互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過(guò)渡。